一种基于单层光刻技术的鞘流阶梯乳化（CFSE）器件，用于生成高密度液滴阵列，实现片上多重荧光数字PCR。 该技术的主要优势有两点：一是基于单层光刻工艺实现了传统上双层光刻工艺才能解决的阶梯乳化液滴生成功能；二是无需提取油相，液滴生成后，存储腔中内相流体（PCR反应体系）的体积占比可高达72%，为构建高密度的液滴阵列、保留后续检测单元集成的预留空间提供了解决方案。 此外，该器件在重复性、稳定性、检测精确性等方面也表现出了优异性能。

鞘流阶梯乳化数字液滴 PCR 相关案例：

一种基于单层光刻技术的鞘流阶梯乳化（CFSE）器件，用于生成高密度液滴阵列，实现片上多重荧光数字PCR。 该技术的主要优势有两点：一是基于单层光刻工艺实现了传统上双层光刻工艺才能解决的阶梯乳化液滴生成功能；二是无需提取油相，液滴生成后，存储腔中内相流体（PCR反应体系）的体积占比可高达72%，为构建高密度的液滴阵列、保留后续检测单元集成的预留空间提供了解决方案。 此外，该器件在重复性、稳定性、检测精确性等方面也表现出了优异性能。

一种可重复使用的微流体芯片，该芯片基于阶梯乳化（Step Emulsification）产生纳升液滴阵列，用于同时对8个样品进行片上多重荧光数字PCR。 装置包含两块玻璃板，可实现预先填充矿物油的快速组装。 通过由单个压力泵同时驱动8个样品通道的阶梯乳化，利用喷嘴阵列快速产生液滴，生成的液滴在U形腔室中可自组装成单层液滴阵列，每个腔室可容纳约10000个0.35 nL体积的微滴。 系统采用的油相配方有效避免和消除了数字PCR温控过程中气泡的产生，在热循环期间不需要采用过压控制。 团队将该芯片应用于临床样本HER2拷贝数变异的定量评估，验证了多重数字PCR性能。

参考文献：

[1]A reusable microfluidic device for generating droplet arrays for digital PCR based on step emulsification.

[2]Development and Application of Digital PCR Technology.

[3]Easy-to-Operate Co-flow Step Emulsification Device for Droplet Digital Polymerase Chain Reaction.