单病毒标记与示踪是一种利用荧光探针或其他标记物对单个或多个病毒粒子进行可视化和追踪的技术，可以实时监测病毒与宿主细胞的相互作用过程，揭示病毒侵染的动态机制。

单病毒标记与示踪技术已经被广泛应用于多种动物病毒的研究，如流感病毒、呼吸道合胞体病毒、禽流感病毒、非洲猪瘟病毒、人类免疫缺陷病毒等。

利用单病毒标记与示踪技术成功解析了猪冠状病毒（Porcine coronavirus, PDCoV）早期入胞及胞内转运的动态过程。首先利用生物素-亲和素系统对PDCoV进行荧光标记，然后利用高速荧光显微镜对活细胞中的单个PDCoV颗粒进行实时跟踪，发现PDCoV主要通过囊泡介导的内吞方式进入细胞，并在内体囊泡中停留约10分钟后释放到细胞质中。PDCoV在细胞内的转运主要依赖微管骨架，并受到微管驱动蛋白dynein和kinesin的调控。该研究为深入理解PDCoV的侵染机制和寻找抗病毒药物提供了重要线索。 

参考文献：

[1]Liu, S. L., Wang, Z. G., Xie, H. Y., Liu, A. A., Lamb, D. C., & Pang, D. W. Single-Virus Tracking: From Imaging Methodologies to Virological Applications. Chemical Reviews, 2020, 120 (3), 1936-1979. https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.chemrev.9b00692

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[3] Zhang, J., Wang, Y., Liang, Y., Zhang, X., Liu, F., & Liang, C. Single-virus tracking reveals the early events of porcine coronavirus infection in living cells. Journal of Virology, 2022, 96(4): e01697-21. https://jvi.asm.org/content/96/4/e01697-21