片段分选磁珠 NGSbead|NGS磁珠|二代测序磁珠试剂盒|Agencourt SPRIselect等效磁
NGSbead磁珠专为二代测序建库时DNA的选择性或非选择性回收，以及PCR产物的纯化回收而设计。该片段分选试剂盒适用于高通量测序文库（NGS）构建中DNA 片段大小快速分选和回收。 NGSbead直接分散在结合缓冲液中，调整磁珠悬浮液和样品的体积比，可以选择左侧、右侧或双侧尺寸的DNA 片段。纯化后的片段不含核苷酸、引物二聚体、接头、酶和盐等污染物。 NGSbead为新一代测序工作流程提供了高效的基于磁珠的净化系统，是专门为配套自动化工作台开发的大规模、高通量的片段分选试剂盒，可以适用于几乎所有自动化仪器，也可人工进行少量样品的片段分离。
■ 产品性能
洗脱得到的DNA纯度高，A260/A280的比值在 1.7-1.9之间, A260/A230的比值通常在2.0以上。磁珠回收率高， 500bp以上回收>90%，200bp以上回收>80%，100bp以上回收>70%。
■ 应用方向
高通量测序文库（NGS）构建中DNA 片段大小快速分选和回收；
可以选择左侧、右侧或双侧尺寸的DNA 片段；
1.8倍体积悬浮液结合后，洗涤，洗脱，可用于PCR、酶反应产物的纯化。
■ 注意事项
1、 磁珠保存在去离子水中，冷冻、干燥和离心可能会影响磁珠的使用效果；
2、 磁珠由于重力作用而沉降属正常现象，使用前，务必充分振荡混匀磁珠；
■ 使用方法
试剂组成
NGSbead：使用前涡旋20秒，使其彻底混匀。
Wash buffer: 80%乙醇（现配现用，4℃保存时间不超过7天）；
Elution buffer: 10 mM Tris-HCl（PH 8.0）或去离子水；
一、 第一次磁珠分选（去除不需要的大片段DNA）
1. NGSbead磁珠室温放置30 min，涡旋混匀至磁珠悬液颜色均一。参考表1，向反应液中加入适量的磁珠溶液，吹打至少10 次以混匀混合液，室温静置5 min。
3. 转移上清至新96 孔板中，丢弃结合有大片段DNA 的磁珠。（注意：不要丢弃上清）
二、 第二次磁珠分选（去除不需要的小片段DNA）
1. 涡旋重悬混匀 NGSbead磁珠至颜色均一，将磁珠溶液加入上述上清中（参考表1），吹打至少10 次以混匀，室温静置5 min。
2. 将96 孔板放在磁力架上分离磁珠，静置至少5 min，直至上清完全澄清。
3. 小心移弃含有不需要DNA 的上清。（注意：不要丢弃磁珠）
三、 乙醇清洗
1. 乙醇清洗步骤中，需要将96 孔板放在磁力架上，在清洗过程中勿碰触磁珠。加入200 μL 的80%乙醇，室温静置至少30 s，移弃上清。重复该步骤一次。
四、 洗脱
1. 将96 孔板放在磁力架上，室温静置5 min，挥发残留的乙醇。（注意：干燥至管底无明显液滴；勿过度干燥磁珠，防止DNA 回收效率过低）。
2. 从磁力架上移走96 孔板，加入10-50 μL 的Elution buffer重悬吹打或振荡混匀磁珠，室温放置2-5 min。（Elution buffer在65-70℃中预热后洗脱效果更好）
3. 将96 孔板放置在磁力架上。溶液澄清后，转移上清至新的96 孔板中。
注意：1. 提供的操作步骤是去除小片段和大片段，获得中间范围内片段的过程。若实验目的是去掉小片段回收大片段或去掉大片段回收小片段，仅需选择合适的磁珠溶液比例操作即可。 2. 该试剂盒磁珠溶液可用于300 bp~800 bp 片段的回收。 3. 由于回收获得的片段的大小与磁珠溶液和样品比例有关，加样量的准确性十分重要，且样品体积尽量不要太小，减少加样误差，一般在50 μL~150 μL 范围。
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