产品组分
组分
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性状
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存储条件
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规格
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A: HAMA
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白色海绵状
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-20℃,避光
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0.2 or 0.5 g/瓶
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B:光引发剂 LAP
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白色粉末状
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室温,避光
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0.025 g/瓶
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储存及运输
干态:-20℃避光,6个月,可常温运输。溶液∶4℃避光,7天; -20C避光,3个月;溶液反复冻融会影响产品性能,尽量现配现用。
有效日期
生产日期见包装。
溶液配制
1配制0.25%(w/v)引发剂标准溶液
(1)取10 mL PBS,加入装有引发剂LAP的棕色瓶中{(内含0.025g LAP);2)以40-50°℃水浴加热溶解15分钟,期间振荡数次;
该LAP标准液在4℃避光条件下可保存12个月。⒉配制HAMA溶液
(建议HAMA-1CK浓度为2-10 %(W/),HAMA-40OK浓度为1-3%(w/))(1)取所需质量的HAMA放入离心管;
(2)取所需体积引发剂标准溶液加入到上述离心管中;
(3)于25-50 ℃溶解1-2 h,期间不断搅拌/振荡;(HAMA黏度较大,溶解时问较长)(4)将HAMA溶液使用0.22um无菌针头过滤器灭菌。
二维细胞培养建议
将HAMA溶液于37℃水浴避光保温备用(防止低温凝胶化);立即将HAMA溶液注入孔板;
(96孔板:50~100uL/孔.48孔板: 100-3CQuL/孔. 24孔板: 300-500iL/孔)以405nm光源,辐照10-30秒使凝胶化, 可通过光照时问及强度调控凝胶强度;将培养基加入孔中覆盖凝胶,置于37℃培养箱中5分钟,清洗样品,吸去培养基;将细胞悬浮液加入到孔板中即可。根据实验设计进行培养基更换、观察拍照等操作
(操作程序无特殊要求)。
三维细胞培养建议
收集细胞并用37℃预热的HAMA溶液重悬,配制细胞悬液;向孔板中加入细胞悬液;
(96 孔板:50-100uL/孔,48孔板:100~300L/孔,24孔板:300-500uL/L)以405nm光源,照射10-30秒使凝胶化,可通过光照时间及强度调控凝胶强度;提示:加入一孔固化一孔,防止细胞沉淀
>向各孔加入培养基,于37℃培养箱中5分钟,清洗样品,移去培养基;
加入新鲜培养基并长期培养。根据实验设计进行培养基更换、观察拍照、免疫荧光染色等操作〈操作程序无特殊要求)。
温馨提示:请勿直视固化光源。
甲基丙烯酰化明胶(GelMA)由于具有生物兼容性好、可见光固化的特点,已广泛应用于细胞3D培养、组织工程、生物3D打印等研究领域,已有上万篇学术论文中采用了GelMA水凝胶。团队研制的GelMA产品具有批次稳定、服务专业等优点,自推出以来,已服务哈佛、剑桥、麻省理工、港大、清华、北大、浙大、上交等国内外高校的数百个课题组。
1 理化性能
图1 (a)三种型号GelMA核磁普;(b)GelMA(GM-90)光固化过程流变分析
图2 三种型号GelMA水溶液的降温sol-gel转变过程,GelMA浓度分别为5 % (a)和10 % (b);及升温gel-sol转变过程,GelMA 浓度分别为5 % (c)和10 % (d)
图3 三种型号GelMA的力学测试:(a) 压缩曲线;(b) 流变曲线(GelMA浓度为10 % w/v)
2 生物相容性
GelMA已广泛用于干细胞、癌细胞、内皮细胞、神经细胞等各类细胞的培养,细胞存活率大于90%,细胞功能化良好。
图4 骨髓间充质干细胞(BMSC)在GelMA表面及内部培养效果
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